2012年4月19日木曜日

木を伐採することを悪いことだと思っていませんか | 一宮市で木造注文住宅と和リフォームのことなら  住まいのいわい [株式会社いわいハウジング]


木を伐採することを悪いことだと思っていませんか

 

前回は、地域環境の観点から住まいの防犯対策を取り上げたのですが、今回からは、地球環境のお話です。

2012年4月17日火曜日

インドでも、蛇遣いが見られなくなっている。 | 2011-08-08 | Time-AZ



インドの市場で固定された昔から続いてきた爬虫類最も有毒であるヘビ使いとフェスティバルでは、人を集めてきた。

しかし、インドの聖像のフォーク・アートの1つは消え去っていると米国のNPR(National Public Radio)は2011年08月08日に報告した。

動物愛護運動家はそれを止めるべきだと言っている。
彼らは、それが残酷さに基づく芸術であると言っている。

今年8月4日に行われたキング・コブラの名誉における年一度の宗教フェスティバルNag Panchamiでさえ、ヘビ使いを見つけるのは、簡単ではなくなっている。

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舗道の上にあぐらをかいて、長くて、白いあごひげ、トルティーヤかごに似た丸くて、平坦な容器の後ろにいたやせたBuddhanathをニューデリーで見つけるのに、丸一日かかった。


なぜ金星赤は何ですか?

Buddhanathは、緩く包装されたオレンジのターバン、および甘く、嬉しい。
「私はキング・コブラを飼っています。」
「彼はシバ神卿のコブラです。そして、私たちは彼を崇拝しています。」と言っている。

通常、青の皮膚をしたヒンズー教の神シバは、彼の首の周りにキング・コブラを付けて、描かれている。

魔法使いはかごでふたをはじき出し、フードが完全に広げられているコブラは箱の中のジャッキのように急に現れた。

それはBuddhanathのヒョウタンフルート先の凝視した。
フルートのチップの動きに続いて、揺れたとき、コブラの黒皮はきらめいた。

2012年4月15日日曜日

(日本語)ここで私の最初のカエルのヤドクガエル属と、テラリウム


こんにちはすぐにはいくつかにもっと写真を見る。

カエルは 60 と 80 ユーロ、土地とほぼ 2 倍、樹木の間、通常は高価です。これは一般的ないくつかのより多くの安っぽいツリー トリコロールとしてが取引されていません。この人生のようにすべてがない品種を支払うことです。

何 1 つ生活実際、テラリウムとメンテナンスになります。
テラリウムは、dendros は、それを改造の必要性は用意されています。

定数を持たなければならない温度依存の種、22 28 ° 間これは簡単だがそれ isn't、空気のような水ではないし、テラリウム温度を 1 cm で変動することができます。これを我々 は電気特殊テラリウムの下部毛布します。

2012年4月14日土曜日

製剤機械技術研究会/JSPME : Q&Aコーナー


Q: 一般に加速試験における温度条件は、保存温度プラス15℃だと聞いています。例えば、室温保存(25℃)とすると加速条件は40℃となります。この15℃というのは何か科学的な意味があるのでしょうか?
A: 医薬品は、実際には局方の標準温度である20℃位の環境で保存されることが多く、この温度での医薬品の安定性試験結果をもとに品質保証期間、保存条件などを決めることは理にかなったことと言える。しかし、こうした条件の実験には時間がかかり、医薬品の開発に遅滞をきたすことになりかねない。アレニウス式は「温度が低ければ反応は進み難く、逆に温度が高い程化学反応が速く進行すること」についての法則性を示す経験式であり、実用上有用であることが認められている。

[アレニウス式:k=Aexp{E/RT} k:反応速度定数 A:頻度因子 E:活性化エネルギー R:気体定数 T:温度]

例えば、Eが35.8キロジュール/モルの時、40℃では25℃の2倍の速さで反応は進む。
実験時間を短縮するために設定する実験条件(加速 試験)として国際的に「40℃」が用いられることが通例となり、我が国でもこの温度を用いている。 医薬品の安定性には温度の他、湿度も大きな影響を与える。湿度が高い程製剤中の水分含量が増し、加水分解を始めとする分解反応は促進される。考えられる湿度条件(0〜100%RH)のうち制御可能な高湿度として75%RHが多くの国で用いられるようになり、現在のICHでも"過酷条件"として40℃、75%RHが国際的に妥当な値として考えられている。

2012年4月12日木曜日

ペットフクロウのエサ


◎ペットフクロウのエサ◎

ペットフクロウの食餌 
  飼育下におけるフクロウの健康維持のために、エサは大変重要です。しかし現在、公にされているフクロウの食餌に関する情報は、極めて不足しています。毎日のエサの要求量ひとつをとっても、厳密なデータはありません。近い例で、飼育下におけるタカなどの猛禽類から得られたデータは、ある程度参考になると考えられます。これによると、猛禽類の一日の餌要求量は、その種類によって体重の4~25%とばらつきが大きいことが分かっています。そして小型のものほど体重当たりのエサ要求割合は高く、大型のものほど低い傾向にあります。

また当然のことながら、各個体においても日々のエサ要求量は変化します。外気温などの環境因子や、生理的活性レベルから影響を受けるためです。繁殖中なら産卵によるメスの消耗や繁殖成績をあげるため、特にバランスのとれた食餌を与えなければなりません。猛禽ブリーダーのなかには繁殖中、猛禽用の一般的なビタミン・ミネラルサプリメントを多く使っているところもあります。しかしこれに関しては疑問の声が上がっています。猛禽類の栄養要求量がいまだ良く分かっていないため、そのようなサプリメントを作ること、またそれを栄養内容が知られていないエサ動物に対して適切に使うことは難しいと考えられるためです。例えば、受胎率をあげるといわれるビタミンEの入ったサプリメントは、ブリーダ� ��の間で信仰されていますが、このビタミンの受胎能を上げる効果は、今のところラットでしか証明されていません。その上、ビタミンEは脂溶性であるため、無分別に添加することは賢明ではなく、他の脂溶性ビタミンA、D、Kのように過剰投与の危険があり、病気を引き起こす可能性も有ります。

ケージ飼いの猛禽類にはエサとして、しばしば初生雛があたえられています。特に小型のハヤブサなどでは、これのみで健康状態を維持することが可能で、繁殖でも一定した成功を収めていることが報告されています。しかし単調なエサのみでの飼育は、鳥にとって最高の状態とはいえず、やはり最も良いのは本来の食性に近い「病原菌に汚染されていない・新鮮で・様々な種類の・丸ごとの」エサ動物を利用して飼養することです。

「汚染のないエサ」は当然のように考えられていますが、生ものを食べているフクロウにとっては常に考慮する必要があります。例えば1994年イングランドからドイツに輸入された冷凍ウズラが原因で、いくつかのブリーダーで全ての若いハヤブサが死亡してしまうという事故が発生しました。これは、冷凍ウズラがパスツレラ菌に汚染されていたために生じたものです。残念ながら、エサ動物の病原微生物検査は、ほとんど行われていないのが実情です。しかし飼い主みずからが検査を行って利用するのも現実的ではありませんので、より安心して与えられるエサを選択して利用することが、唯一最善の防衛策と考えられます。また屋外の禽舎で飼育している場合、エサを置く場所も重要となります。エサを置く場所が地 面に近ければ、それだけ禽舎床や排せつ物などによる汚染の危険性が増します。地面にはクロストリジウムなどの病原菌が潜んでいる可能性もあるからです。

「できるだけ新鮮なエサ」を与えることも非常に重要です。常温で生ものは急速に腐敗が進みますので、一般的な腐敗菌の増殖は常に考慮しなければなりません。しかし新鮮といっても、場合によっては逆に危険なケースもありえます。フクロウの伝染病リスクは時に餌からもたらされることがあります。家禽やハトを餌として与えていると、新鮮であるほど寄生虫などのリスクが高まることになります。特に若いフクロウはこのような感染症に対して非常に弱く、命を落とす可能性も有ります。

2012年4月11日水曜日

トウモロコシ澱粉の糖化を増強するトリコデルマ・レセイ(TRICHODERMAREESEI)A−アミラーゼ|詳細 - Astamuse(アスタミューゼ)


以下の情報は、出願公開日時点(2010年06月24日)のものです。

0001

本出願は、2007年3月14日に出願された米国仮出願60/906,811及び2007年3月14日出願の60/906,812の優先権を主張する。この各出願は引用により全体を組入れる。
配列表

0002

SEQ ID NOS:1−7を含む配列表も添付する。これらは添付書類としてその全体を本願に組入れられる。

0003

トリコデルマ・レセイ由来のマルトース産生α−アミラーゼ(TrAA)、これをコードする核酸及びこの核酸を含む宿主細胞が提供される。TrAAを使用する方法はデンプンを糖化して高グルコース含有シロップにすることを含む。


0004

高フルクトース含有コーンシロップ(HFCS)は、高いフルクトース含量と、砂糖に匹敵する甘みをもつコーンシロップの加工品であり、HFCSはそのためソフトドリンクと他の加工食品において砂糖の代替品として有用である。HFCSは現在、10億ドル規模の産業を代表している。HFCSを製造する方法は酸加水分解から一連の酵素-触媒反応まで幾年にわたり進歩してきた。
(1) 液状化:α-アミラーゼ(EC3.2.1.1)は、最初に30-40%w/wの乾燥固体(ds)を含むデンプン懸濁液をマルトースデキストランへ分解するために使用される。α-アミラーゼは内部α-1,4-D-グルコシド結合の無作為な切断を触媒するエンドヒドロラーゼである。液状化は通常、高温、例えば約90-100℃で行われるので、熱に安定なα-アミラーゼ、例えばバシラス属のα-アミラーゼが、この工程には好まれる。
(2) 糖化:グルコアミラーゼと/又はマルトースα-アミラーゼは、普通、液状化の後に生成されたマルトデキストランの非還元末端の加水分解を触媒し、D-グルコース、マルトース及びイソマルトースを遊離するために使用される。脱分岐酵素、例えば、プルラナーゼは糖化を促すために使用できる。糖化は通常、高温、例えば60℃、pH4.3で酸性条件下で起こる。この工程で使用されるグルコアミラーゼは通常、菌類から得られる。例えば、Optidex(商標登録)L400で使用されるアスペルギルス・ニゲル(Aspergillus niger)グルコアミラーゼ(AnGA)またはフミコラ・グリセア(Humicola grisea)グルコアミラーゼ(HgGA)である。この用途に現在使用されているマルトース α-アミラーゼは植物アミラーゼとアスペルギルス・オリゼ(Aspergillus oryzae)由来のα-アミラーゼ、Clarase(商標登録)Lの活性成分、を含む。
(3) 異性化:高グルコース含量のシロップは、甘い製品を望む場合には、さらに加工を受けフルクトースにされる。グルコースをフルクトースにする異性化はグルコースイソメラーゼで触媒され、約42%(w/v)のフルクトース、50-52%のグルコース、及び他の糖の混合物を生成する。さらに操作を加えて最終的にフルクトースの含量が、例えば42%、55%、又は90%の市販品質のHFCSを生成できる。

0005

α-アミラーゼとグルコアミラーゼは、直接にコーンシロップの加工バッチに加えられ、再使用はされない。一方、グルコースイソメラーゼは、カラムに固定化され、それに接して糖の混合物が通過する。グルコースイソメラーゼカラムは酵素がその活性の大部分を喪失するまで再使用される。

0006

糖化工程はHFCS製造の律速段階である。糖化は、48-72時間にわたり起こり、その時間までに多くの菌類のグルコアミラーゼは相当の活性を失う。さらに、マルトースα-アミラーゼとグルコアミラーゼの両者は糖化を触媒するために使用できるが、この酵素は通常異なる最適pHと温度で働く。例えば、マルトースα-アミラーゼは通常、少なくともpH5.0の最適pHと55℃未満の最適温度をもつが、AnGAは通常pH4.0-4.5の最適pHと約60℃の最適温度をもつ。2種の酵素の間の反応条件の違いはpHと温度を調整することを必要にし、全反応工程を遅くし、不溶性のアミロース凝集物の生成を引き起こすかも知れない。残存する細菌α-アミラーゼは、pHが低くされると失活される。しかし、後で細菌α-アミラーゼは酸に安定なα-アミラーゼにより置き換えられて� ��良い。

0007

糖化工程は約95-97%w/wグルコース、1-2%w/w マルトース及び0.5-2%w/w イソマルトースからなる組成のシロップを産生することが理想的である。この高グルコース含有シロップは異性化工程、上記工程(3)で使用でき、または結晶性グルコースの製造にも用いられる。これらの高いグルコース濃度は容易には達成できない。例えば、トリコデルマ・レセイ(Trichoderma reesei) グルコアミラーゼ(TrGA)は、AnGA又はHgGAと比較して改善された活性を提供する。しかし、TrGAは最終的なグルコース濃度が約88%w/wの製品を生成する。さらに、シロップ中のグルコース濃度が高い場合はグルコースのマルトースとマルトトリオースへの転換が促される。

0008

従って、HFCSを作る改善された製造法が本願技術分野で必要とされ、この製造法は、菌類のグルコアミラーゼとともに使用できる最適pHと最適温度をもつα-アミラーゼを使用する糖化を含む。また、より短時間で糖化を触媒できるα-アミラーゼも必要とされている。さらに、糖化後に約96%w/wのグルコース濃度をもつシロップを産生し、これらの目的を達成できるα-アミラーゼが求められている。


0009

本願技術分野のこれら及び他の要望は、トリコデルマ・レセイ(Trichoderma reesei)由来のマルトースα-アミラーゼ(TrAA)により満たされる。この酵素、この酵素の変異種、及びこれらをコードする核酸が提供される。TrAAを発現する宿主細胞もまた提供される。

0010

TrAAは種々の製造法において有利に用いられるが、特に液状化の後に生成されるマルトデキストランの糖化においてそうである。ある実施態様では、TrAAはマルトースの製造法において、それのみ、又はプルラナーゼのような他の酵素と併せて使用される。TrAAは比較的低いpHと高温でマルトースの製造をうまく触媒し、菌類のグルコアミラーゼ、例えばAnGAと共存できる反応条件を取ることができる。さらに、TrAAを産生する容易さの故に、これはマルトース製造に現在使用されているα-アミラーゼよりも、経済的である。

0011

別の実施態様では、TrAAは高濃度のグルコースを製造する糖化工程で使用される。TrAAはグルコースからマルトオリゴ糖を形成する逆反応をうまく抑え、処理を受けたコーンスターチ混合物中のグルコース濃度を約96%w/vもの高濃度にすることができる。さらに、このグルコース濃度を、反応がグルコアミラーゼのみで触媒されるときよりも短時間で達成することができる。ある実施態様では、グルコアミラーゼがTrAAに加えられる。このグルコアミラーゼは、TrGAのような菌類のグルコアミラーゼでも良く、または、例えば、TrGA、HgGA及びAnGAの組合せのように、グルコアミラーゼの混合物が加えられても良い。

0012

従って、本発明の一つの目的は以下を含む単離されたポリペプチドを提供することである。(i)SEQ ID NO:3の21-463残基、又は(ii)トリコデルマ・レセイα-アミラーゼ(TrAA)の変異種、ここでこの変異種は、α-アミラーゼ活性をもち、SEQ ID NO:3の21-463残基と少なくとも80%、少なくとも90%または少なくとも95%アミノ酸配列が同一である。例えば、この変異種は、SEQID NO:3の21-463残基と比較して1-10個のアミノ酸が置換され、挿入されまたは欠失している。または、このポリペプチドはSEQ ID NO:3を含み、またはSEQ ID NO:3の21-463の残基を含んでも良い。このポリペプチドはトリコデルマ・レセイ以外の種からのシグナル配列を含んでも良い。ある実施態様では、このポリペプチドはグリコシル化されている。この単離されたポリペプチドをさらに精製しても良い。

0013

本発明の他の目的は上記のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを提供することである。このポリヌクレオチドはSEQ ID No:2、つまりcDNA配列を含む。SEQ ID NO:2のT残基がU(ウラシル)残基と置換された場合、単離されたmRNAも提供される。

0014

本発明の別の目的は上記のポリヌクレオチドを含むベクターと、このベクターを含む細菌を提供することである。このポリヌクレオチドを発現する宿主細胞もまた提供される。ここでこの宿主細胞は、ある実施態様では、トリコデルマ属であり、特にT・レセイである。または、宿主はRL-P37単離体、糸状菌細胞、アスペルギルス属、フザリウム属またはペニシリウム属でも良い。アスペルギルス宿主細胞はアスペルギルス・ニードランス(Aspergillus nidulans)、A・アワモリ(A.awamori)、A・オリゼ(A.oryzae)、A・アキュレアタス(A.aculeatus)、A・ニゲル、またはA.ジャポニカス(A.japonicus)でも良い。フザリウム宿主細胞は、フザリウム・オキシスポラム(Fusarium oxysporum)、又はF・ソラニ(F. solani)でも良い。宿主細胞はさらに、異種のグルコアミラーゼ、つまり、宿主細胞と同一の種ではないグルコアミラーゼをコードする核酸を含んでも良い。このグルコアミラーゼは、例えば、フミコラ・グリセア(Humicola grisea)グルコアミラーゼでも良い。その代わり、あるいはさらに、宿主細胞は、宿主細胞の内在性グルコアミラーゼを発現しなくても良い。

0015

本発明の別の目的は以下を含む、デンプンの糖化法を提供する。すなわち、液状化されたデンプン溶液に上記のポリペプチドを加え、液状化されたデンプン溶液を糖化する。このポリペプチドは乾燥固体1トン当たり約0.3-1kgで液状化されたデンプン溶液へ加えられる。この液状化されたデンプン溶液は、約20-35%w/w乾燥固体の液状化されたデンプンのスラリーでも良い。

0016

この方法はさらに、グルコアミラーゼをこの液状化されたデンプン溶液に加える工程を含んでも良く、この工程でデンプン溶液の糖化が行われ高グルコース含量のシロップが製造される。高グルコース含量のシロップ中のグルコース濃度は少なくとも約97%w/w dsに達する。高グルコース含量のシロップ中のグルコースの最大濃度は液状化したデンプン溶液にこのポリペプチドを加えてから約24時間以内に達しても良い。このグルコアミラーゼは、植物、菌類、又は細菌から生じても良い。例えば、このグルコアミラーゼはトリコデルマ・レセイグルコアミラーゼ(TrGA)、アスペルギルス・ニゲル グルコアミラーゼ(AnGA)、又はフミコラ・グリセアグルコアミラーゼ(HgGA)でも良い。このグルコアミラーゼは、アスペルギルス属、A.アワモリ、A.オリゼ、タラロマイセス属(Talaromyces sp)、T・エメルソニ(T.emersonii)、T・レイセッタナス(T.leycettanus)、T・デュポンチ(T.duponti)、T・テルモフィラス(T.thermophilus)、クロストリジウム属(Clostridium sp)、C・テルモアミロリチカム(C.thermoamylolyticum)または、C・テルモヒドロスルフリカム(C. thermohydrosulfuricum)である菌類に由来しても良い。このグルコアミラーゼは約0.02-2.0GAU/g dsまたは、約0.1-1.0GAU/g dsの量で加えられても良い。脱分岐酵素、異性化酵素、プルラナーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ又はそれらの組合せを非限定的に含む他の酵素が追加されても良い。デンプンの糖化の方法はさらに糖化されたデンプン溶液を醗酵させてエタノールを製造することを含んでも良い。この液状化されたデンプン溶液は、約40℃から約60℃でもよい。液状化されたデンプン溶液は約pH4.0から約pH6.0、または約pH4.2から約pH4.8でもよい。

0017

上記のポリペプチドと任意に、グルコアミラーゼ、プルラナーゼ、β-アミラーゼ、TrAA以外の菌類のα-アミラーゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ、へミセルラーゼ、リパーゼ、クチナーゼ、イソアミラーゼ又はそれらの組合せを含むデンプン処理剤組成物を提供することが本発明のさらなる目的である。

0018

溶液又はゲルに上記のポリペプチドを含むベーキング組成物を提供することが本発明の別の目的である。パン等を焼く方法は請求項46のベーキング組成物を焼き上げる材料へ加え、材料を焼くことを含む。

0019

さらにこのポリペプチドと任意に他の酵素を水溶液中に含む織物の糊抜き剤組成物を提供することが本発明の目的である。織物の糊抜きの方法は織物を糊抜きするに十分な時間、織物と糊抜き剤を接触させることを含む。


0020

添付した図面はこの明細書に組み入れられ、その一部であり、種々の実施態様を説明している。図面において、
図1はグルコアミラーゼの存在下のTrAAの、グルコアミラーゼのみにより達成されるより優れた効率で糖化工程を触媒する能力を示す。y軸は、pH4.2、60℃で糖化工程の24時間後に製造されたグルコースの重量パーセント(DP 1)を示す。反応は1.0kg/mt ds グルコアミラーゼ (GA) のみまたは、kg/mt dsで示された量のTrAAと併せたGAにより触媒された。例えば1mgの酵素の32%乾燥固体を含む50mL溶液への添加は、この溶液が1mg酵素/16g ds、または0.0625kg/mt dsを含むことになることに留意せよ。図2はTrAAの低pHでマルトースの製造を触媒する能力を示す。y軸は、55℃で0.5kg/mt ds TrAAにより触媒されるマルトース製造工程の24時間後に製造されるマルトース(DP2)の重量パーセントを示す。反応のpHはx-軸に示されている。図3はTrAAのClarase(商標登録) Lに匹敵する効率でマルトースの製造を触媒する性能を示す。マルトースの製造工程48時間後に製造されるマルトースの重量%(DP2)がy軸上に示されている。この反応を触媒するために使用される酵素はx-軸に示されている。"Clarase":pH5.5、55℃での10 SKBU/g dsのClarase(商標登録) L。"10 TrAA":pH4.5、60℃での10SKBU/g ds トリコデルマ・レセイα-アミラーゼ。"15TrAA"と"20TrAA"はそれぞれ、pH4.5、60℃で15KBU/g dsと20 SKBU/g dsを表す。"20 TrAA+ PU"は、pH4.5、60℃で20 SKBU/g ds TrAAへ0.25kg/mt dsのプルラナーゼを加えることを表す。図4は、プルラナーゼの最適量でTrAAにより触媒されたマルトース製造工程を示す。y-軸は、0.5kg/mt ds TrAAの存在下で、pH4.6、58℃で48時間後の製造されたマルトース(DP2)の重量%を示す。x-軸は反応へ加えられたkg/mt dsでのプルラナーゼの量を示す。図5は、TrAA(レーン1)を発現している細胞の培養液の一部の、又は精製したTrAA(レーン2)のSDS-PAGE電気泳動で分離したタンパク質を示す。分子量マーカーはレーンMに示されている。図6Aは、基質としてCeralpha試薬(Megazyme International Ireland, Ltd., Wiclow.Ireland;Cat.No.K-CERA)を使用した、pHの関数として精製TrAAの相対的なα-アミラーゼ活性(尺度は任意)を示す。図6Bは、同じ人工基質を使用した、温度の関数として精製TrAAの相対的α-アミラーゼ活性(尺度は任意)を示す。図7Aと図7BはSEQ ID NOS:1-7の一覧である。

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0021

詳細な説明
菌類のα-アミラーゼはトリコデルマ・レセイから提供される。TrAAは現在使用されているα-アミラーゼに勝るいくつかの利点を提供する。第一に、TrAAは比較的低いpHと高い温度で活性であり、この酵素を同一の反応条件で菌類のグルコアミラーゼと組み合わせて使用することを可能にする。これはpHと温度がα-アミラーゼ又はグルコアミラーゼの最適な使用のため再調整されなければならないバッチプロセスで、糖化反応を行わせる必要をなくす。第二に、プルラナーゼと組み合わせて、TrAAは、普通使用されるより高価な酵素、例えばClarase(商標登録) Lと同一の効率でマルトースの製造を触媒する。

0022

1. 定義と略号
この詳細な説明に従い、以下の略号と定義が使用される。本願で使用される場合、文脈から明らかに違う場合を除き、単数形は複数をもさす。例えば、「酵素」というときは複数のそのような酵素を含み、「調合剤」というときは1以上の調合剤と、本願技術分野の技術者に知られているそれらの均等物などをさす。

0023

別に定義されている場合を除き、本願で使用される全ての技術的及び科学的用語は本願技術分野の普通の技術者により普通に理解されているのと同一の意味をもつ。以下の用語について下記に示す。

0024

1.1 定義
「アミラーゼ」は、特に、デンプンの分解を触媒できる酵素をいう。一般的に、α-アミラーゼ(EC 3.2.1.1;α-D-(1→4)-グルカングルカノヒドロラーゼ)は無作為にデンプン分子内部のα-D-(1→4)O-グリコシド結合を切断する、エンド型酵素として定義される。対照的に、エキソ型アミロース分解酵素、例えばマルトースα-アミラーゼ(EC 3.2.1.133);β-アミラーゼ(EC 3.2.1.2;とα-D-(1→4)-グルカン マルトヒドロラーゼ)、は基質の非還元末端からデンプン分子を切断する。β-アミラーゼ、α-グルコシダーゼ(EC3.2.1.20;α-D-グルコシド グルコヒドラーゼ)、グルコアミラーゼ(EC3.2.1.3;α-D- D-(1→4)-グルカン グルコヒドロラーゼ)、及び製品に特異的なアミラーゼは、デンプンから特定の長さのマルトオリゴ糖を生成できる。グルコアミラーゼはアミロースとアミロペクチン分子の非還元性末端からグルコシル残基を遊離する。グルコアミラーゼは、α-1,4結合よりはるかに遅い速度ではあるが、α-1-6とα-1-3結合の加水分解も触媒する。

0025

「α-アミラーゼ変異種」、「α-アミラーゼ変異タンパク質」と「変異酵素」は野生型α-アミラーゼのアミノ酸配列を修飾したアミノ酸配列をもつα-アミラーゼタンパク質をいう。本願で使用する場合、「親酵素」「親配列」「親ポリペプチド」「野生型α-アミラーゼタンパク質」と「親ポリペプチド」はこのα-アミラーゼ変異ポリペプチドが基礎にしている酵素とポリペプチドをいう。例えば、トリコデルマ・レセイα-アミラーゼである。「親核酸」は親ポリペプチドをコードしている核酸配列をいう。野生型のα-アミラーゼは、天然に生じる。「α-アミラーゼ変異種」は成熟タンパク質、つまりシグナル配列のないタンパク質のアミノ酸残基が、野生型α-アミラーゼと異なる。このα-アミラーゼ変異種は異種のα-アミラーゼポリペプチ ドを含有する融合タンパク質であり得る。例えば、このα-アミラーゼタンパク質は別のα-アミラーゼのシグナルペプチドが連結した成熟型α-アミラーゼタンパク質を含むことができる。

0026

「変異種」はポリペプチドまたは核酸について用いる。用語「変異種」は用語「突然変異体」と相互に交換して使用できる。変異種は、アミノ酸又はヌクレオチド配列のそれぞれについて、一以上の位置での挿入、置換、転換、切断(truncation)、及び/または逆位を含んでいるものを含む。変異核酸は、本願に示す核酸配列にハイブリダイズできる配列に相補的な配列を含むことができる。例えば、変異配列は厳格な条件、例えば、50℃と0.2XSSC(1X SSC=0.15M NaCl、0.015M クエン酸ナトリウム、pH7.0)で、本願に示すヌクレオチドへハイブリダイズできる配列に相補的である。より特異的には、用語「変異」は高度に厳格な条件、例えば、65℃と0.1X SSCで本願に示す核酸配列にハイブリダイズできる配列に相補的である配列を含む。

0027

本願で使用する場合、用語「発現」は遺伝子の核酸配列に基づきポリペプチドが産生される過程をいう。この過程は転写と翻訳の両者を含む。

0028

「単離された」は、その配列が、自然では組み合わされている少なくとも1つの他の成分から少なくとも実質的に取り出されていることをいう。

0029

「精製された」は物質が比較的に純粋な状態、例えば少なくとも約90%純度、少なくとも約95%純度、または少なくとも約98%純度にあることをいう。

0030

「熱的に安定」とは酵素が高温に暴露された後に活性を保持していることをいう。α-アミラーゼのような、酵素の熱的安定性はその半減期(t1/2)により測定される。酵素活性の半分は半減期までに失われる。半減期の値は残存アミラーゼ活性を測定することにより、定めた条件で計算される。

0031

「pH範囲」は、その酵素が、5以上のpH単位にわたり酸性から塩基性条件で触媒活性を示す能力をいう。

0032

本願で使用する場合、「pHに安定」とは、広い範囲のpHにわたり酵素が活性を保持する能力についていう。

0033

本願で使用する場合、「アミノ酸配列」は「ポリペプチド」及び/または用語「タンパク質」と同義語である。ある場合には、用語「アミノ酸配列」は用語「ペプチド」と同義語である。ある場合では、用語「アミノ酸配列」は用語「酵素」と同義語である。

0034

本願で使用する場合、「ヌクレオチド配列」または「核酸配列」はオリゴヌクレオチド配列又はポリヌクレオチド配列及びそれらの変異体、断片及び誘導体をいう。このヌクレオチド配列はゲノム、合成または組換えに由来しても良く、二重鎖又は一本鎖でも良く、これらはセンス鎖(sense strand)又はアンチセンス鎖でも良い。本願で使用する場合、用語「ヌクレオチド配列」は、ゲノムDNA、cDNA、合成DNA及びRNAを含む。

0035

「相同体」は対象アミノ酸配列や対象ヌクレオチド配列とある程度の同一性又は「相同性」をもつものをいう。「相同性配列」は別の配列と、あるパーセント、例えば、80%、85%、90%、95%、又は99%の配列の同等性をもつポリヌクレオチドまたはポリペプチドを含む。パーセント同一性は、配列の位置あわせをして、2本の配列を比較したとき、同一である塩基又はアミノ酸のパーセンテージをいう。アミノ酸が置換、削除又は加えられたときは、対象配列と比較してアミノ酸配列は同一ではない。配列の同一性は通常、対象タンパク質の成熟配列に関して測定される。つまり、例えば、シグナル配列を除去する、翻訳後の修飾の後に行う。通常、相同体は対象アミノ酸配列と同一の活性部位残基を含む。相同体はまた、対象タンパク質と異 なる酵素的性質をもっても良いが、マルトース産生α-アミラーゼ活性も保持する。

0036

本願で使用する場合、「ハイブリダイゼーション」は核酸の鎖が相補鎖とが塩基対形成により結合する過程と、ポリメラーセ連鎖反応(PCR)技術で行われるような増幅の過程をいう。α-アミラーゼ変異核酸は一本鎖又は二本鎖DNAまたはRNAとして、RNA/DNAへテロ二重鎖又はRNA/DNAコポリマーとして存在しても良い。本願で使用する場合、「コポリマー」はリボヌクレオチドとデオキシリボヌクレオチドの両者を含む一本鎖核酸配列をいう。α-アミラーゼ変異種核酸はさらに発現を増強するためにコドンが最適化されても良い。

0037

本願で使用する場合、「合成」化合物は、生体外(in vitro)の化学的または酵素的合成により作られる。これは、宿主生物、例えば、メチロトローフ性酵母ピキア・ハンセヌラ(Pichia Hansenula)、ストレプトマイセス(Streptomyces)及びトリコデルマ、例えばT・レセイ又は他の選択した発現宿主、の最適なコドン用法により調製されたα-アミラーゼ変異核酸を非限定的に含む。

0038

本願で使用する場合、「形質転換細胞」は組換えDNA技術の使用により形質転換された細菌及び菌類細胞の両者等の細胞を含む。形質転換は、通常1以上のヌクレオチド配列の細胞への挿入により起こる。挿入されたヌクレオチド配列は異種の核酸配列、つまり、形質転換を受ける細胞にとり固有ではない配列、例えば、融合タンパク質の配列でも良い。

0039

本願で使用する場合、「機能的に連結している」とは、説明された成分が意図したように機能するような関係にあることをいう。例えば、コーディング領域と機能的に連結している調節配列は、そのコーディング領域の発現がその制御配列と両立する条件で達成されるように連結している。

0040

本願で使用する場合、「生物学的に活性」とは、必ずしも同一という程度でなくとも良いが、天然の配列と類似の構造、調節又は生化学的機能をもつ配列をいう。

0041

スクロース - Wikipedia


スクロース (sucrose)、またはショ糖(蔗糖、しょとう)は、糖の一種であり、砂糖の主成分である。

スクロースは、グルコース(ブドウ糖)とフルクトース(果糖)が結合した糖であり、二糖類の一種である。無色結晶、甘味を有する、水に溶けるという二糖類共通の性質を持つ。加水分解するとグルコースとフルクトースを生ずる。

水溶性が高く、25°Cにおいて、1gの水に2.1g溶ける[1]。

先進国における主要な甘味料であり、砂糖の主成分である。一般にはサトウキビや、サトウダイコン(テンサイ)から抽出し、純度を高め結晶化したものである。原料としては他にソルガム(モロコシ)とサトウカエデがある。ちなみにショ糖の結晶を大きく成長させると氷砂糖になる。

約170°Cに加熱すると、カラメル(キャラメル)と呼ばれる褐色の物質に変化する。カラメルは食用となり、独特の香りを持つ。カラメルはカスタードプディングなどに使用される。